Диагностика гепатита С: лабораторные анализы, ПЦР и дополнительное обследование

Своевременная диагностика гепатита С минимизирует риски развития тяжелых последствий болезни. Вирус, размножаясь в организме, приводит к уничтожению гепатоцитов и развитию стойкого аутоиммунного воспаления. Основные методы диагностики помогают выявить вирус на ранних стадиях инфицирования. Если заболевание обнаружено, необходимо более полное обследование. Для этого проводятся инструментальные виды проверки течения болезни.

Как определить и выявить гепатит С?

Если болезнь протекает в безжелтушной смазанной форме, то практически невозможно понять, что у тебя гепатит С. В 80% случаев заболевание остается незамеченным, а возбудитель вируса постепенно разрушает печеночные клетки и весь организм. 

Какие обследования нужно пройти?

Для верификации диагноза и осложнений заболевания у взрослых и у детей обязательно используют аппаратные и лабораторные методы диагностики. Аппаратные процедуры позволяют визуализировать страдающий орган, определить степень разрушения гепатоцитов, отсутствие или наличие тяжелых осложнений (опухоли, фиброза, жирового гепатоза и т. д). Лабораторные анализы – часть дифференциальной диагностики. По анализу крови можно выявить самого возбудителя или наличие антител к нему.

Как определить гепатит С в домашних условиях? Для этого существуют новейшие экспресс-тесты (подробнее о них можно почитать в данной статье). Они помогают с высокой точностью обнаружить заболевание после самостоятельно проведенного анализа дома. Для проверки необходима капля крови или слюны. Однако окончательный диагноз ставится только после проведения лабораторных исследований в медицинском учреждении.

Лабораторная диагностика: какие анализы сдают

В настоящее время лабораторная диагностика HCV позволяет не только с точностью определить наличие вируса в организме человека, но и установить, сколько приблизительно времени прошло с момента заражения, насколько активно происходит развитие заболевания.

Первичные диагностические исследования проходят в несколько этапов и позволяют получить ответы на ряд вопросов, необходимых для определения дальнейшей тактики терапии: 

• насколько эффективно иммунная система отреагировала на контакт с вирусом;
• как давно HCV находится в организме человека;
• какова фаза инфекции (острая или хроническая в стадии обострения);
• насколько тяжело протекает заболевание (чем выше вирусная нагрузка, тем активнее патологический процесс);
• генотип и подтип вируса (имеет решающее значение для назначения конкретных препаратов).

Но перечисленные исследования целесообразно проводить только после окончательного подтверждения диагноза. Для этого сдают несколько лабораторных анализов.

Когда можно обнаружить вирус в крови

После попадания в организм начинается активная репликация вируса. Однако до достижения определенного уровня, HCV в крови не обнаруживается. Самые современные высокочувствительные тест-системы ПЦР способны выявить болезнь спустя 3–4 недели. Но при подозрении на возможность заражения и отрицательном результате исследования рекомендуют провести повторный тест. 

Анализ на гепатит Ц путем проведения иммуноферментного исследования (ИФА) информативен на сроке 10–16 недель после заражения. За это время антитела к вирусу вырабатываются в достаточном для определения количестве. 

Но при этом необходимо учитывать возможность как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов ИФА. Такая вероятность существует при:

• беременности (вне зависимости от срока);
• иммунодефицитных состояниях;
• аутоиммунных заболеваниях;
• онкологии, затрагивающей систему кроветворения.

Кроме того нельзя исключать и человеческий фактор, то есть лабораторную ошибку, допущенную при выполнении анализа. Поэтому при положительном результате доктора рекомендуют сделать исследование повторно. Аналогичной тактики придерживаются и в том случае, если специфические симптомы прогрессируют на фоне отрицательных ИФА и/или ПЦР.

Какие анализы сдают при подозрении на гепатит С

Диагностическое обследование пациента с возможной HCV-инфекцией регламентировано международными медицинскими протоколами.

В соответствии с рекомендациями ВОЗ, анализы проводят в таком порядке:

• печеночные пробы (на начальной стадии заболевания или латентном течении гепатита С показатели могут укладываться в физиологические границы нормы);
• ИФА (на первом этапе рекомендуют сделать суммарный ИФА, определяющий совокупность иммуноглобулинов типа G и M, при положительном результате выполняют отдельно анализы на IgG и IgM к HCV);
• полимеразная цепная реакция (ПЦР), делится на качественный (определяет только наличие патогенной РНК в крови), количественный (оценивает уровень РНК) и генотипирование (выявляет точную разновидность HCV – генотип и подтип). 

В дополнение врач назначает и стандартный перечень анализов. Он включает исследование на ВИЧ и другие виды вирусного и инфекционного гепатита, ОАК и ОАМ, оценку липидного и белкового профиля крови, иммунограмму и др. При подозрении на наличие фиброза, цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы показана биопсия печени. 

ПЦР диагностика

Исследования, проводимые методом ПЦР, считаются наиболее достоверными способами диагностики гепатита C. Проведение полимеразной цепной реакции позволяет выявить специфические вирусные РНК в крови человека, оценить их количество и структуру нуклеотидной цепи.

ПЦР диагностика может проводиться несколькими методами (каждый отличается по технологии проведения и стоимости для пациента):

Разновидность ПЦР	Описание анализа
Качественный	Направлен только на выявление РНК вируса гепатита C
Количественный	Проводится для оценки вирусной нагрузки (расшифровку проводит только врач)
Генотипирование	Необходимо для определения разновидности инфекции

ПЦР рекомендуют проводить после исследования анти HCV методом ИФА, который позволяет определить специфические антитела к гепатиту С. Наличие IgM свидетельствует об остром течении инфекции, IgG – о хроническом или латентном. По титру антител можно предположить активность патологического процесса, однако точную вирусную нагрузку определяют только методом ПЦР.

Качественный анализ

Качественный анализ является своего рода проверкой, есть ли РНК HCV в крови человека. В отличие от результатов ИФА, которые зависят от определенных факторов (например, наличия беременности или состояния иммунной системы) данные ПЦР однозначны. Но при помощи этого исследования можно выявить, есть ли РНК гепатита С или нет. 

Для полной клинической картины необходимы другие тесты. Поэтому в бланке лаборатории указано только наименование анализа и полученный результат. Средняя стоимость качественного ПЦР в частных клинических кабинетах составляет порядка 1000 рублей.

Количественное выявление РНК HCV

Проводится для определения уровня вирусной нагрузки, то есть количество копий вируса гепатита С в определенном объеме плазмы крови. Единицы измерения МЕ/мл. Высокие показатели указывают на острое течение заболевания и часто свидетельствуют о риске серьезных поражений печени. 

Данные для расшифровки результатов анализа приведены в таблице, но интерпретировать исследования и ставить окончательный диагноз должен только инфекционист-гепатолог.

Полученный результат	Расшифровка
Отрицательный	Человек не заражен HCV или количество РНК в крови слишком низко для определения при помощи лабораторных тест-систем (возможно в течение 1–4 недель после инфицирования)
1,5 МЕ/мл	Низкая вирусная нагрузка, прогноз благоприятен
4ˑ106 –2ˑ108МЕ/мл	Средняя вирусная нагрузка, служит показанием к немедленному началу терапии
Выше 2ˑ108МЕ/мл	Высокая вирусная нагрузка, прогноз неблагоприятен. Необходима противовирусная терапия после всесторонней оценки состояния печени

В лабораториях могут отличаться марки тест-систем и, соответственно, используемые единицы измерения и нормы. Поэтому при расшифровке рекомендуют ориентироваться на референсные значения. 

Стоимость исследования в платной лаборатории достигает 2500 рублей. 

Генотипирование

Генотипирование один из основных анализов на этапе подготовки пациента к началу курса противовирусной терапии. Исследование основано на отличиях в структуре известных 6 разновидностей (и около 100 подтипов) HCV. В бланке с результатами указывают выявленный генотип и субтип, например, 1b или 3a и т.д. Полученные данные позволяют врачу определить перечень назначаемых препаратов и продолжительность лечения, объяснить пациенту возможные исходы терапии. 

Цена проведения генотипирования в частной клинике колеблется в пределах 1000 рублей. 

Экспресс-тест на гепатит С

Экспресс-тест на вирусный гепатит С рассчитан на выявление антител, которые вырабатывает иммунная система после попадания вируса в организм.

Тест-полоски бывают:

1. Для диагностики по крови. В коробке содержится набор всех необходимых инструментов, сразу после вскрытия система готова к работе. Прилагается инструкция, описывающая пошаговый алгоритм действия, начиная с забора крови, заканчивая оценкой полученного результата.
2. Диагностика по слюне. Специальным одноразовым аппаратом собирают небольшое количество слюны или десневой жидкости. Результат оценивают через 20 минут. 

Cito-тесты можно купить в аптеке без рецепта. Их достоверность выше 96%. Все зависит от правильности забора биоматериала, соблюдения правил проведения тестирования, фирмы-изготовителя, способа хранения и т. д. Цены на изделия разнятся от 300 до 1600 рублей.

Как правильно сдавать анализы

Общий анализ крови сдают в любое время, по истечении часа от приема пищи. Анализ крови на биохимические показатели строго натощак утром, с 9 до 11 часов. Причина в биологическом ритме организма. Ночной голод должен быть не менее 10 часов. 

При использовании тест-полосок дома, важно чтобы гематокрит (текучесть крови) был в пределах нормы. Густая кровь искажает полученные результаты. 

Вирусологический анализ на гепатит (определение антигенов и антител) делают из венозной крови, она обладает большей диагностической ценностью. Между забором биоматериала и последним приемом пищи должно пройти 4–6 часов. Накануне лучше отказаться от слишком жирной пищи, алкоголя, переедания. 

Если недавно проходили Rg-графию, ректальный осмотр прямой кишки, физиопроцедуры, присутствовал прием сильнодействующих препаратов и антибиотиков, то необходимо сказать об этом своему доктору или лаборанту. 

Изменения в составе крови

Покажет ли общий анализ крови гепатит С? Нет, в нем отсутствуют показатели для дифференциальной диагностики вируса. Но опытного врача-гепатолога должен насторожить лейкоцитоз и резкое увеличение показателей СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Развернутый анализ на биохимию, выявит характерные для болезни изменения в работе печение, появление грозных осложнений хронического и острого гепатита С.

Приведем типичные лабораторные тесты и их диагностическую ценность:

Исследуемый показатель	Диагностическая ценность
Аспартатаминотрансфераза (АсАт)	Если фермента больше нормы, то говорят о гибели гепатоцитов или миоцитов. Исключение – беременные женщины, где допускается незначительное превышение нормы
Аланинаминотрансфераза (АлАт)	При гепатитах норма фермента превышена в несколько раз
Щелочная фосфатаза (ЩФ)	>нормы при костных патологиях, туб- или онкопроцессах в печени, циррозе, любых гепатитах вирусного генеза
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ)	> нормы при разрушении печеночной ткани
Глутаматдегидрогеназа (ГДГ)	Отклонения от нормы наблюдают при тяжелых расстройствах работы печени, желчевыводящих путей, острых токсических воздействий
Сорбитолдегидрогеназа (СДГ)	В норме практически отсутствует. Появление фермента укажет на вирусный или невирусный гепатит, цирроз
Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ)	>нормы при гепатитах на фоне систематических алкогольных интоксикациях
Фруктозо-монофосфат-альдолаза (ФМФА)	В норме содержится только в следовых количествах. Активное присутствие фермента наблюдают при острых формах гепатитов, особенно сопряженных с профессиональной вредностью
Общий белок	>нормы при неправильной работе печеночной ткани
Альбумин	<нормы при циррозе, гепатите, злокачественных или метастатических процессах
Билирубин	Значительное превышение нормы регистрируют в желтушный период гепатита С
Холестерин и его фракции	>нормы при серьезных погрешностях питания, циррозе, но особенно на фоне алкоголизма
Триглицериды	>нормы при циррозах и вирусных гепатитах <нормы о внепеченочных патологиях или несбалансированном питании
Аммиак	Свидетель тяжелых, а порою и угрожающих жизни печеночных патологий, предкоматозных состояний
Железо	>нормы при гепатитах. <нормы при циррозе
Мочевина	<нормы при жировом или фиброзном перерождении гепатоцитов, циррозе, печеночной коме
Протромбиновый индекс	>нормы при раке печени

Методы дополнительной диагностики

Аппаратные исследования имеют высокую диагностическую ценность, особенно для выявления хронического гепатита С. Это важно для скорейшего начала терапии и в борьбе с недопущением печеночной недостаточности.

Биопсия печени

Исследование предусматривает забор биоптата для дальнейшего гистологического анализа полученной печеночной ткани. Биопсия печени –  один из самых точных анализов дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита С, позволяющих проверить наличие вируса в тканях, возможные злокачественные процессы, степень фиброза и т. д.

Чаще всего прибегают к трем видам биопсии:

1. Чрескожная. Прокалывают переднюю брюшную полость, далее под контролем УЗИ или вслепую достигают печени, где и производят забор биоптата. Манипуляция не требует общего обезболивания, малотравматичная с минимальным периодом нахождения в стационаре.
2. Лапароскопическая.  Выполняют под общим наркозом, посредством лапароскопа – аппарата с видеотехникой. Операция инвазивная, но доктор будет видеть состояние органа на экране, а биоптат возьмут из самых пораженных участков печеночной ткани.
3. Трансъюгулярная. Подходит для пациентов с повышенным риском кровотечения. Прокол делают в области крупных кровеносных сосудов, исследование проводят под ЭКГ-контролем. 

Противопоказания:

• тяжелые нарушения в системе свертывания крови;
• наличие единичных или множественных эхинококковых кист;
• сосудистые опухоли печеночной ткани;
• присутствие гноя или гнойное расплавление желчевыводящих путей;
• эмпиема плевры справа, поддиафрагмальный абсцесс;
• синдром хилаидити;
• запущенная форма эмфиземы легких;
• желтуха, как результат формирования участка обструкции в области дренирования желчного протока;
• нежелание пациента давать письменное разрешение на проведение процедуры. 

Большинство осложнений возникают в первые 24 часа после биопсии. Поэтому пациента оставляют в клинике до следующего утра. Ведется мониторинг артериального давления и частоты сердечных сокращений. 

Это поможет своевременно диагностировать кровотечение из пункционного канала. Рекомендуют постельный режим 6–8 часов. О подготовке к биопсии подробно расскажет доктор, все его рекомендации следует строго выполнять.

УЗИ органов брюшной полости

УЗИ – распространенная доступная по цене аппаратная диагностическая процедура для исследования органов брюшной полости. Ультразвук, дополненный портальной системой Doppler, и с контрастным усилением являются основными методами оценки состояния паренхимы печени, портальной венозной гипертензии и других изменений, характерных для течения гепатита С.

Подготовка к УЗИ несложная, но требующая тщательного выполнения всех рекомендаций. На исследование приходят строго натощак, с периодом голода не меньше 10 часов. За несколько дней отказываются от всех продуктов, вызывающих метеоризм. 

Если кишечник остается вздутым, показано ветрогонное средство. Накануне разрешено сделать высокую очистительную клизму. 

Фибросканирование (эластометрия)

Фибросканирование – неинвазивная диагностическая процедура для обнаружения участков ремоделирования соединительной ткани печени. Измерение проводится с помощью специального датчика, размещенного на уровне печени между двумя ребрами. Во время измерения пациент ощущает только легкие, безвредные, безболезненные  вибрации на коже. 

Под аппаратом больной находится всего несколько минут, манипуляцию повторяют при первой необходимости. Приблизительно за 2–3 часа до осмотра пациенту запрещают принимать пищу. Эластометрия  противопоказана при тяжелых формах ожирения, асцита и дыхательной недостаточности.

КТ,  МРТ

Если УЗИ дало неопределенный результат, то назначают КТ (компьютерную томографию) или МРТ (магнитно-резонансная томография) печени.

Эти исследования имеют общие предосторожности и противопоказания:

• масса тела >150 кг;
• металлические украшения, молнии, пуговицы снимают;
• обязательно скажите своему врачу о случаях аллергии, длительно применяемых медикаментах, фобиях закрытого пространства;
• психические расстройства, неадекватное поведение пациента;
• некоторые заболевания, такие как миелома и почечная недостаточность, требуют коррекции плана Rg-облучения;
• ношение брекет-систем.

КТ не назначают при беременности, если в кишечнике имеется бариевая смесь или последний прием пищи был раньше, чем за 4 часа до процедуры. МРТ не делают, если на место исследования наложен гипс, имеется металлический протез или водитель сердечного ритма. 

Компьютерную томографию делают, используя Rg-лучи, МРТ – магнитные волны. Полученные послойные снимки помогают визуализировать структурные изменение (фиброз, цирроз, жировой гепатоз) и размер органа. Если используют контрастное вещество, то на снимках становятся видны очаговые изменения, диаметром >1 см. 

Обследование при беременности

Ранняя диагностика болезни особенно полезна при беременности. Гепатит С способен серьезно осложнять течение беременности, увеличивает риск развития внутриутробных патологий, может привести к нарушениям функций печени. Золотым стандартом является обследование за полгода до планирования малыша. Если присутствие инфекции будет обнаружено, то нужно пройти курс терапии до беременности. 

Если беременная не была обследована до зачатия, то от специфических анализов нельзя отказываться ни в коем случае. Первый раз исследование на гепатит С проводят в женской консультации при постановке на учет, второй раз – во втором триместре, третий – в  третьем. При наличии жалоб, позволяющих заподозрить заболевание, назначают внеплановое лабораторное тестирование. 

Заключение

Как показывает практика, у врачей в арсенале есть все необходимые диагностические возможности для своевременного обнаружения инфекции. Потому, как только человек заподозрит или поймет, что он инфицирован, следует незамедлительно отправляться на прием к инфекционисту, терапевту или гепатологу. 

Только своевременное начало правильно подобранной схемы терапии приведет к полному излечению или длительной ремиссии.